如何检测地沟油(地沟油检测技术的应用)
地沟油(也叫生物柴油)主要是指从餐饮业的油水分离系统或下水道捞出的含油漂浮物，也包括一些酸败的油炸老油和劣质动物脂肪，是人们丢弃的各种劣质脂肪的总称。中国是世界上植物油消费量最大的国家，地沟油的数量也在逐年增加。一些不法商人，在利益的驱使下，将劣质地沟油当食用油卖。据估计，每年约有200-300万吨地沟油回流到餐桌上，对社会和食品安全造成极大危害。重金属、毒素、过氧化值等。地沟油严重超标，并含有洗涤剂等化学杂质，对人体非常有害。食用地沟油会引起呕吐、头痛、腹泻等不良反应。，而且长期摄入甚至会成为致癌诱因。地沟油掺入地沟油的现象在我国由来已久。除了暴利，缺乏有效的检测技术也是一个重要原因。近10年来，我国发展了地沟油检测技术，涉及以下技术手段:薄层色谱法——鉴别醛酮迁移率差异；荧光光谱-十二烷基磺酸钠的测定:Top 空气相色谱-质谱-D-甘油酸和己醛的测定量少、特征性强，食用油谱图模型的建立；电导率-测量水相的电导率值；气相色谱法(GC)-测定脂肪酸组成谱和胆固醇，包括U/S值分析；重金属含量采用原子吸收光谱法或ICP-MS测定，国外学者对地沟油成分的分析检测也做了大量的研究和探索。本文重点介绍国外一些生物柴油成分的分析检测技术和方法，具体如下:
1.利用薄层色谱和图像分析技术检测生物柴油中的甘油。
薄层色谱法为快速测定生物柴油样品中的甘油含量提供了一种简单而经济的方法。使用一些容易获得的材料、商业扫描仪和一些图像分析软件，我们已经证明能够检测低至0.1%体积的游离甘油。虽然生物柴油甘油的最大限量为0.02%，但需要指出的是，这一过程并不包括任何丰富的生物柴油样品预处理方法。可想而知，这样的过程会将灵敏度提高不止一个数量级。即便如此，这种方法也能检测到6微升样品中0.1%的甘油，相当于6毫升的绝对体积检测限。
使用不相容的丁醇和水作为流动相，这具有明显的优点。生物柴油和生物柴油之间甘油的明显分离表明其他成分不会产生假阳性检测。这个过程也可以通过图像进行定量分析。点的大小随着样品中甘油含量的增加而单调变化。从下图中的结果可以明显看出，可以从标准生物柴油-甘油混合物构建校准曲线。
我们使用一个非常简单的图像分析过程，它只基于图像中的颜色信息。我们知道有更复杂的方法来解决这个问题，包括形状信息，点的大小和间距以及更好的消除噪声的方法。这些实验的重点是开发一个简单可靠的检测程序来检测游离甘油和阈值。事实上，我们也可以把它作为额外的好处。如果有合适的样品制备方法，该程序可能成为其他在线方法(气相色谱和高效液相色谱)的可行替代方法。
2.气相色谱-质谱和核磁共振法测定生物柴油中的不饱和脂肪酸。
基于气相色谱(GC)、气相色谱-质谱(GC-MS)和核磁共振技术，对生物柴油中的多不饱和脂肪酸酯(PUFAs)进行了表征和评价。这些多不饱和脂肪酸酯可以通过使用强极性毛细管柱(100%氰丙基硅)的气相色谱进行分离、鉴定和评估。气相色谱-质谱用于准确鉴定和估计生物柴油中存在的酯类和异构体。多不饱和脂肪酸含量的估算非常重要，因为多不饱和脂肪酸是14214生物柴油的一部分。没有标准方法来估计生物柴油中多不饱和脂肪酸的总含量。气相色谱的定量发展还可以定量分析油酸和二十二碳六烯酸(c20:5和c22:6)的脂肪酸甲基。油酸和二十二碳六烯酸存在表明生物柴油含有鱼油。此外，核磁共振技术也被用来确定多不饱和脂肪酸是否含有双键。多不饱和脂肪酸的含量由化学位移区估算，总强度对应于NMR谱中所有类型的双键。根据所开发的方法，气相色谱指纹图谱是对不同生物柴油样品中多不饱和脂肪酸含量的估计，其含量在1000ppm处最低。
3.气相色谱-质谱法灵敏测定生物柴油中的植物蔗糖苷。
建立了一种定量分析生物柴油中植物蔗糖苷(脂肪酸甲酯)的新方法。这种方法比现有的方法灵敏得多。相比之前公布的最低限量15mg/kg，有了50g/kg的最低限量。气相色谱-质谱(GC-MS)用于测定简单预处理和硅烷化样品。该分析通过监测单个离子在147，204，217 m/z下进行，该单个离子是硅烷醇基的特定离子。胆固醇β-D-葡萄糖苷用作定量分析的内标。还介绍了修饰物的合成、内标物的纯化以及核磁共振和质谱的表征。与其他方法相比，该方法具有简化样品制备、避免额外的预处理步骤、使用5%双(三)硅乙酰胺和三甲基氯硅烷作为衍生试剂可完全衍生糖羟基等优点。在一定条件下，可获得≥89%高收率。实验室误差和中间精密度的评定要稳定，需要通过循环实验进一步评定。
在甲酯形成油脂的酯交换过程中形成的SG可能导致燃料过滤性差。建立了一种分析该化合物含量的方法，该方法基于高温GC/MS，通过SIM模式，以胆固醇β-D-葡萄糖苷为内标进行定量分析。该程序的主要优点是简化了样品制备，在去除基质前无需任何额外的分析。此外，可以获得高回收率和显著的下限和检测限。此外，对SG的衍生进行了优化，采用氮氧基双(三甲基硅基)乙酰胺和5%甲基氯硅烷作为硅烷化催化剂。对该方法的统计评价表明，误差和准确度均能满足要求，因此该方法适用于即将开展的实验室间试验的进一步评价。4.体积排阻色谱法分离生物柴油中的脂肪酸甲酯和游离脂肪酸。
尺寸排阻色谱根据分子大小分离溶质。植物油或动物中的游离脂肪酸(FFA)、脂肪酸甲酯(FAME)和单酰基甘油(MG)具有相似的分子大小。它们不能在以四氢呋喃(THF)为流动相的单一基线分离柱(100，300 mm 7.8 mmid，5微米)中分离。以甲苯为流动相时，甘油三酯(TG)、甘油二酯(DG)、镁和脂肪酸甲酯(FAME)可以完全分离，但甘油二酯(DG)和脂肪酸甲酯(FAME)之间没有基线分析。另外，MG和FAME的洗脱顺序是相反的。然而，所有上述脂质的基线分离可以通过使用含有四氢呋喃、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯或乙酸的甲苯作为溶剂改性剂来实现。乙酸(0.25%)为溶剂改进剂提供了最佳溶液，并且所有参考峰都是对称的。每种脂质的检测限为0.1毫克。所有脂质(1-100毫克)的相关系数大于0.99。因此，测量生物柴油反应器中的生物柴油产品非常简单。
柴油中的酰基甘油、脂肪酸甲酯(FAME)和游离脂肪酸(FFA)可通过100-Philomon基线分离柱(100，300 mm 7.8 mmid，5微米)分离，并用含0.25%乙酸的甲苯洗脱。现象HPSEC分离机理，以甲苯为流动相，不是纯分子筛。加入少量极性溶剂后，这些极性溶质与凝胶基质的相互作用减弱。在改性研究中，0.25%冰醋酸最适合分离这些脂质。
5.生物柴油中甾醇糖苷和生物柴油沉淀物的分析。
生物柴油通常通过植物油与短链醇在碱性催化剂存在下的酯交换来生产。生物柴油的次级组分中存在未反应的试剂、副产物、添加剂和自氧化产物，如水、游离甘油、游离脂肪酸、催化剂、残留的异丙醇、不皂化物(植物甾醇、抗氧化剂和烃)、肥皂和聚合物。通常，这些微量组分会显著影响生物柴油的性质，如冷流特性、酸值、十六烷值、氧化稳定性等。甾醇糖苷是生物柴油中最重要的微量成分，由于其极性和有限的溶解度，可以加速沉淀物的形成，并可能阻止燃油过滤。本文采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(ELSD)对生物柴油中甾醇糖苷(SG)的含量进行了分析和评价，并对生物柴油沉淀物中甾醇糖苷(SG)的含量进行了分析和评价。甾醇糖苷(SG)被认为是大豆生物柴油沉淀的主要成分，离心浓缩后的生物柴油中存在SG峰。
本文提出了一种直接测定生物柴油中甾醇糖苷的方法——反相高效液相色谱法。该方法允许检测到的甾体糖苷浓度降低约0.01 mg/ml。对浓缩甾醇糖苷的B100分析表明，甾醇糖苷可以从甲酯峰中分离出来。高效液相色谱法的优点在于，它是一种快速的方法，仅通过简单的离心过程就可以分析和检测生物柴油中的甾醇糖苷。从浓缩部分的重量或体积百分比，可以通过浓缩样品计算出原样品中SG的浓度。该方法的局限性在于只适用于生物柴油中SG的浓度，必须高于或等于30%，但不能低于该值。可以更严格地研究离心，以满足生物柴油样品中甾醇糖苷(SG)低水平分析的要求。
